PCR實(shi)驗(yan)室又(you)叫基因(yin)擴(kuo)增(zeng)實(shi)驗(yan)室，PCR是聚合(he)酶鏈式(shi)反(fan)應(PolymeraseChainReaction)的(de)(de)簡稱。是一(yi)種分子生物學技術，用(yong)于放大(da)特(te)定的(de)(de)DNA片段(duan)，可看作生物體(ti)外(wai)的(de)(de)特(te)殊DNA復(fu)制(zhi)。通過DNA基因(yin)追蹤系統，能(neng)迅(xun)速掌(zhang)握患者體(ti)內的(de)(de)病(bing)毒含量(liang)，其(qi)精確度(du)高達納(na)米級別，精確檢(jian)測乙肝病(bing)毒在(zai)(zai)患者體(ti)內存在(zai)(zai)的(de)(de)數量(liang)、是否(fou)復(fu)制(zhi)、是否(fou)傳染(ran)、傳染(ran)性有多強、是否(fou)必要服(fu)藥、肝功能(neng)有否(fou)異常改(gai)變能(neng)及(ji)時(shi)判斷(duan)病(bing)人最適合(he)使用(yong)哪類(lei)抗病(bing)毒藥物、判斷(duan)藥物療(liao)效如何、給臨(lin)床治療(liao)提供了可靠的(de)(de)檢(jian)驗(yan)依據。

　　PCR是分子生(sheng)物(wu)學(xue)研究和實驗的常規方法(fa)(fa)，廣泛應用于生(sheng)物(wu)學(xue)各個領域，例(li)如：艾滋病(bing)(bing)檢(jian)測(ce)、乙型肝(gan)炎、禽疫病(bing)(bing)、癌(ai)基因的檢(jian)測(ce)和診斷，DNA指紋、個體(ti)識別、親子鑒定及法(fa)(fa)醫物(wu)證(zheng)，動、植(zhi)物(wu)檢(jian)疫，動物(wu)及其衍生(sheng)產品(pin)檢(jian)測(ce)，動物(wu)飼料、化妝品(pin)、食品(pin)衛生(sheng)檢(jian)測(ce)，轉(zhuan)基因作物(wu)與轉(zhuan)基因微生(sheng)物(wu)檢(jian)測(ce)等。

　　平均每1~2年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)發生一次(ci)傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)重(zhong)大(da)疫(yi)情(qing)(qing)，如(ru)2003年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)重(zhong)癥(zheng)急(ji)性呼吸綜合征（SARS冠狀(zhuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)），2005年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)禽流(liu)感病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)（HSN1禽流(liu)感病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)）,2008年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)手足口（腸道病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)），2011年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)發熱伴血小板綜合征（新(xin)布尼(ni)亞病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)），2013年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)流(liu)感病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)（H7N9病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)），2014年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)禽流(liu)感（H10N8病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)）和(he)埃博拉病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)，2015年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)禽流(liu)感病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)（H5N6病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)），2016年(nian)(nian)(nian)(nian)(nian)的(de)(de)塞(sai)卡病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)，以及目前的(de)(de)新(xin)型冠狀(zhuang)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)肺炎(yan)(yan)（COVID-19病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)）。疫(yi)情(qing)(qing)爆發突出表現(xian)為發病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)急(ji)、進(jin)展快、傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)(ran)性強，因(yin)而傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)原(yuan)體(ti)(ti)的(de)(de)快速、準確鑒(jian)定，成控制疫(yi)情(qing)(qing)關鍵因(yin)素。此類(lei)(lei)疾病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)的(de)(de)診(zhen)斷大(da)部分(fen)是通過(guo)核酸擴增(zeng)的(de)(de)方式(shi)來實(shi)(shi)現(xian)檢測(ce)的(de)(de)，而該過(guo)程均需要在高標準的(de)(de)PCR實(shi)(shi)驗室(shi)中由專(zhuan)業人(ren)士操(cao)作(zuo)完成，因(yin)而PCR實(shi)(shi)驗室(shi)在傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)重(zhong)大(da)疫(yi)情(qing)(qing)防控中的(de)(de)疾病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)診(zhen)斷和(he)服(fu)務成為不(bu)可或缺(que)的(de)(de)力量(liang)。除了(le)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)類(lei)(lei)傳(chuan)(chuan)染(ran)(ran)(ran)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)，PCR實(shi)(shi)驗室(shi)可開(kai)展的(de)(de)病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)原(yuan)微生物檢測(ce)包括細菌類(lei)(lei)、真(zhen)菌類(lei)(lei)以及原(yuan)生動(dong)物等疾病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)的(de)(de)診(zhen)斷，如(ru)臨床常(chang)見的(de)(de)巨細胞病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)、EB病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)、結(jie)核分(fen)枝桿菌、甲(jia)乙型流(liu)感病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(du)肺炎(yan)(yan)、支原(yuan)體(ti)(ti)及衣(yi)原(yuan)體(ti)(ti)感染(ran)(ran)(ran)、乙肝、丙肝、戊肝等，PCR實(shi)(shi)驗室(shi)在疾病(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)(bing)診(zhen)斷和(he)控制中起到極為重(zhong)要的(de)(de)作(zuo)用。

　　標(biao)準(zhun)的(de)PCR實驗室分為四個(ge)區(qu)(qu)(qu)(qu)域:試(shi)劑(ji)貯存和(he)準(zhun)備(bei)(bei)區(qu)(qu)(qu)(qu)、樣(yang)品處理區(qu)(qu)(qu)(qu)、核(he)酸擴增(zeng)區(qu)(qu)(qu)(qu)、產物分析區(qu)(qu)(qu)(qu)。為避免交叉污染,進入各個(ge)工作區(qu)(qu)(qu)(qu)域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試(shi)劑(ji)貯存和(he)準(zhun)備(bei)(bei)區(qu)(qu)(qu)(qu)→標(biao)本制備(bei)(bei)區(qu)(qu)(qu)(qu)→擴増反應混合物配(pei)制和(he)擴增(zeng)區(qu)(qu)(qu)(qu)→擴增(zeng)產物分析區(qu)(qu)(qu)(qu)各實驗區(qu)(qu)(qu)(qu)之(zhi)間(jian)的(de)試(shi)劑(ji)及(ji)樣(yang)品傳遞(di)(di)應通過(guo)傳遞(di)(di)窗進行。

　　PCR實驗(yan)室可以(yi)是(shi)分散(san)形(xing)式(shi)，也(ye)可以(yi)是(shi)組合(he)形(xing)式(shi)。完成一組PCR實驗(yan)，通常應經過(guo)試(shi)劑配制、樣品處理(li)、核酸擴增及(ji)產物分析四個(ge)實驗(yan)過(guo)程。

　　1、分散形(xing)式PCR實(shi)驗室：

　　所謂分(fen)散形(xing)式(shi)(shi)PCR實驗室，是指完成(cheng)上(shang)述實驗過程的實驗用房彼此(ci)相距(ju)較(jiao)遠，呈分(fen)散布置形(xing)式(shi)(shi)。對于(yu)(yu)這種布置形(xing)式(shi)(shi)的PCR驗室，由于(yu)(yu)各個實驗之間(jian)不易(yi)相互干擾，因此(ci)無需特殊(shu)條件(jian)要求(qiu)。

　　2、組合形式PCR實驗室：

　　所謂組(zu)合形(xing)式(shi)PCR實(shi)驗(yan)(yan)室(shi),是指完成PCR四個實(shi)驗(yan)(yan)過(guo)程的實(shi)驗(yan)(yan)用房相鄰布置，組(zu)成獨(du)立實(shi)驗(yan)(yan)區(qu)域的形(xing)式(shi)。對于組(zu)合形(xing)式(shi)PCR實(shi)驗(yan)(yan)室(shi)，由于各個實(shi)驗(yan)(yan)間集中布置，容易造成相互干擾，因此(ci)，對總體布局(ju)以及屏障系統具有一定的要(yao)求(qiu)。各室(shi)在入口處設緩沖間，以減少室(shi)內外空氣交換。

　　PCR實驗室主要功能

　　1、試(shi)劑儲存和(he)準備(bei)區(qu)的(de)(de)功能(neng)是(shi)：貯(zhu)存試(shi)劑的(de)(de)制備(bei)、試(shi)劑的(de)(de)分裝和(he)擴(kuo)增反應混合液(ye)的(de)(de)準備(bei)，以(yi)及(ji)離(li)心(xin)管、吸(xi)頭等(deng)消耗品的(de)(de)貯(zhu)存和(he)準備(bei)。貯(zhu)存試(shi)劑和(he)用于標本(ben)制備(bei)的(de)(de)消耗品等(deng)材料應當(dang)直接運送至試(shi)劑貯(zhu)存和(he)準備(bei)區(qu)，不能(neng)經過擴(kuo)增檢測區(qu)，試(shi)劑盒中的(de)(de)陽性(xing)對照品及(ji)質控品不應當(dang)保存在該(gai)區(qu)，應當(dang)保存在標本(ben)處理區(qu)。

　　2、標本(ben)制備區(qu)的(de)功能(neng)是：核酸(suan)(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuo)增反應(ying)(ying)管(guan)。對于(yu)涉及臨(lin)床樣(yang)本(ben)的(de)操(cao)作，應(ying)(ying)符合生(sheng)物安全(quan)二級實驗(yan)室防護設(she)備、個人防護和操(cao)作規范(fan)的(de)要求。由(you)于(yu)在(zai)(zai)樣(yang)本(ben)混合、核酸(suan)純化過程中可能(neng)會發生(sheng)氣溶膠所致的(de)污染(ran)，可通過在(zai)(zai)本(ben)區(qu)內(nei)設(she)立正壓條件(jian)，避免(mian)從鄰近區(qu)進入本(ben)區(qu)的(de)氣溶膠污染(ran)。為避免(mian)樣(yang)本(ben)間的(de)交叉污染(ran)，加入待測(ce)核酸(suan)后，必須(xu)蓋好含反應(ying)(ying)混合液的(de)反應(ying)(ying)管(guan)。對具有潛在(zai)(zai)傳(chuan)染(ran)危險(xian)性的(de)材料，必須(xu)在(zai)(zai)生(sheng)物安全(quan)柜(ju)內(nei)開蓋，并有明確的(de)樣(yang)本(ben)處理和滅(mie)活程序。

　　3、核酸擴(kuo)增區的功(gong)能(neng)是(shi)：DNA合成、DNA擴(kuo)增及檢測。為避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠所致的污染，應(ying)當盡(jin)量減少(shao)在本區內的走動。必(bi)須注(zhu)意的是(shi)，所有經(jing)過檢測的反應(ying)管不得在此區域(yu)打(da)開。

　　4、擴(kuo)增產(chan)物分(fen)析(xi)區的(de)(de)功能是：擴(kuo)增片(pian)段的(de)(de)進一步(bu)分(fen)析(xi)測定，如雜(za)交(jiao)(jiao)、酶切電泳(yong)、變性高效液相分(fen)析(xi)、測序等。核(he)酸擴(kuo)增后產(chan)物的(de)(de)分(fen)析(xi)方(fang)(fang)法多種多樣，如膜上(shang)或(huo)微孔板或(huo)芯片(pian)上(shang)探針雜(za)交(jiao)(jiao)方(fang)(fang)法（放(fang)射(she)性核(he)素標記或(huo)非放(fang)射(she)性核(he)素標記）、直接或(huo)酶切后瓊脂糖凝(ning)膠電泳(yong)、聚丙(bing)烯酰胺凝(ning)膠電泳(yong)、Southern轉移、核(he)酸測序方(fang)(fang)法、質譜(pu)分(fen)析(xi)等。

　　擴(kuo)增產(chan)物(wu)(wu)(wu)分析區是PCR實(shi)(shi)驗室最主要的擴(kuo)增產(chan)物(wu)(wu)(wu)污染來源，因此應注意避免(mian)通(tong)過本區的物(wu)(wu)(wu)品及工作服將擴(kuo)增產(chan)物(wu)(wu)(wu)帶出(chu)。在(zai)使用PCR-ELISA方法檢測擴(kuo)增產(chan)物(wu)(wu)(wu)時(shi)，必(bi)須(xu)(xu)使用洗(xi)板機(ji)洗(xi)板，廢液(ye)必(bi)須(xu)(xu)收集至1mol/LHCl中，并(bing)且不(bu)能在(zai)實(shi)(shi)驗室內(nei)傾(qing)倒，而應當(dang)至遠離PCR實(shi)(shi)驗室的地方棄(qi)掉。用過的吸頭(tou)也必(bi)須(xu)(xu)放至1mol/LHCl中浸泡后再(zai)放到垃圾袋中按(an)程(cheng)序處理(li)，如焚燒。由于本區有可能會用到某些可致基因突變和有毒物(wu)(wu)(wu)質如溴化乙錠、丙烯酰胺、甲醛或放射性核素等，故應當(dang)注意實(shi)(shi)驗人員的安全(quan)防(fang)護(hu)。

　　PCR實驗室設計主要依據及標準

　　《醫(yi)療(liao)器械生(sheng)產質量管(guan)理(li)規(gui)(gui)范(fan)附錄體外診斷試(shi)(shi)劑(ji)》、《醫(yi)療(liao)器械生(sheng)產質量管(guan)理(li)規(gui)(gui)范(fan)體外診斷試(shi)(shi)劑(ji)現場檢(jian)查指導(dao)原(yuan)則》條款(kuan)中(zhong)，明確對PCR試(shi)(shi)劑(ji)的(de)(de)生(sheng)產和(he)檢(jian)驗環境做(zuo)出(chu)規(gui)(gui)定。此外現行衛生(sheng)行業的(de)(de)法規(gui)(gui)、標準(zhun)以及(ji)相(xiang)關文獻(xian)中(zhong)對于PCR檢(jian)驗實驗室均作出(chu)規(gui)(gui)定，主要涉及(ji)《全國臨床(chuang)(chuang)檢(jian)驗規(gui)(gui)程(cheng)》（第(di)三版）、《醫(yi)療(liao)機(ji)構臨床(chuang)(chuang)基(ji)因擴(kuo)增管(guan)理(li)辦法》、《醫(yi)療(liao)機(ji)構臨床(chuang)(chuang)基(ji)因擴(kuo)增檢(jian)驗實驗室工作導(dao)則》及(ji)《臨床(chuang)(chuang)診斷中(zhong)聚(ju)合(he)酶(mei)鏈反應（PCR）技術的(de)(de)應用》等行業標準(zhun)的(de)(de)相(xiang)關要求。

　　PCR實驗室建設要點

　　1、主體結(jie)構(gou)

　　主(zhu)體(ti)為潔凈(jing)彩鋼板和(he)鋁合金(jin)(jin)型材。房(fang)間內(nei)外角均采用鋁合金(jin)(jin)50內(nei)圓角鋁，解決(jue)了(le)易污染、積灰(hui)、清(qing)洗困難的問題。結構牢固，線條簡潔美(mei)觀大(da)方，密封(feng)性能好。

　　2、標準的三(san)區(qu)分(fen)隔和壓差(cha)控制

　　將(jiang)PCR過程(cheng)分為(wei)試劑制備(bei)、樣品制備(bei)和PCR擴(kuo)增檢測三個獨(du)立的實(shi)驗區(qu)(qu)。整個區(qu)(qu)域有一個整體緩(huan)沖走廊。每個獨(du)立的實(shi)驗區(qu)(qu)都有一個緩(huan)沖區(qu)(qu)。

　　PCR實(shi)(shi)(shi)驗室空調通風(feng)系統設計及壓力控制PCR實(shi)(shi)(shi)驗室并沒有嚴格(ge)的(de)凈化(hua)要(yao)求,但(dan)是為避免(mian)各(ge)個實(shi)(shi)(shi)驗區域間交叉污染的(de)可能性(xing),宜采用全(quan)送全(quan)排的(de)氣流(liu)組(zu)織形(xing)式。同時(shi),要(yao)嚴格(ge)控制送、排風(feng)的(de)比例以保證各(ge)實(shi)(shi)(shi)驗區的(de)壓力要(yao)求。

　　3、消毒

　　紫(zi)外(wai)(wai)線燈安裝在(zai)三個實驗區、三個緩沖區的頂部和(he)轉(zhuan)移窗內進(jin)行(xing)(xing)消毒。在(zai)試劑(ji)制備(bei)區和(he)標本制備(bei)區還設置移動(dong)式紫(zi)外(wai)(wai)線燈，對實驗臺進(jin)行(xing)(xing)局(ju)部消毒。

　　4、機械連鎖(suo)不銹(xiu)鋼傳遞窗(chuang)

　　試(shi)劑和標(biao)本通過機械(xie)聯鎖不銹鋼（不推薦電子(zi)聯鎖）傳輸(shu)窗口傳輸(shu)，確保試(shi)劑和標(biao)本在傳輸(shu)過程中不受污(wu)染（人物分流）。

　　5、地面

　　地(di)(di)(di)面一(yi)般(ban)采用(yong)PVC卷材地(di)(di)(di)面或自流(liu)地(di)(di)(di)板，整體性好。易(yi)清潔，耐(nai)腐蝕。也可以(yi)使用(yong)水磨石地(di)(di)(di)面，或大瓷(ci)磚(zhuan)（至少800mm×800mm）接縫(feng)需要小于2mm。盡量避免產(chan)塵和積(ji)塵現象。

　　6、照明

　　燈具應選用(yong)凈化燈具，便(bian)于(yu)清潔、無塵。

　　PCR實驗室主要儀器設備

　　1、試(shi)劑準(zhun)備區儀器設備主要有(you)冰(bing)箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離(li)心機等,加樣器、天平除了要專用外,還(huan)應(ying)(ying)定期校準(zhun)。試(shi)劑分(fen)裝應(ying)(ying)在超凈臺中進行擴增反應(ying)(ying)混合液應(ying)(ying)使(shi)用分(fen)子生物學級的,試(shi)劑制(zhi)備好(hao)后(hou)應(ying)(ying)有(you)質(zhi)檢:一(yi)是(shi)否(fou)有(you)污染、二是(shi)檢測試(shi)劑的擴增效果；

　　2、標本制備區(qu)儀器(qi)設備主要(yao)有生物安全柜、加樣器(qi)、離心機、溫育儀、混勻器(qi)等(deng)；

　　3、擴(kuo)增(zeng)區的(de)主要儀(yi)(yi)(yi)器是核酸擴(kuo)增(zeng)儀(yi)(yi)(yi)、超(chao)凈臺、微量加樣器、離(li)心機可(ke)移(yi)動紫外(wai)燈(deng)。擴(kuo)増(zeng)儀(yi)(yi)(yi)需進行校準(zhun)。并(bing)配備UPS電(dian)(dian)源,以(yi)防止由于電(dian)(dian)壓(ya)的(de)波動,停電(dian)(dian)對擴(kuo)增(zeng)效果的(de)影響。

　　4、分析區所使用(yong)的儀(yi)器(qi)設備主要有酶標儀(yi)、洗板(ban)機、加樣(yang)器(qi)和水浴箱、DNA測序儀(yi)等(deng)。

　　PCR實(shi)驗室裝(zhuang)修建設(she)主要(yao)造(zao)價估價：

　　PCR實(shi)驗(yan)室(shi)對潔凈和(he)恒溫(wen)恒濕(shi)有不同需(xu)求，所(suo)以一般會分為以下(xia)幾類：

　　1、對潔(jie)凈度沒有明確要求的(de)PCR實(shi)驗室整(zheng)體裝修(xiu)造價約2500~3000元/㎡；

　　2、潔凈度為(wei)十萬級的恒溫恒濕潔凈要求的PCR實驗室整體裝修造(zao)價約3000~4000元/㎡；

　　以上估價是我公司按(an)以往項目經驗(yan)總(zong)結的大概估價，僅供(gong)參考，其包含(han)內容：彩(cai)鋼(gang)板(ban)裝飾裝修、地面、電氣照明插座(zuo)、紫外線滅菌(jun)、空(kong)調通風(feng)系統、自控系統、實驗(yan)家(jia)具和給(gei)排水(shui)等內容。不含(han)實驗(yan)儀器(qi)設備、消防和環保處(chu)理部份(fen)。